质粒图谱读取管理器 Alpha 0.1.2 图文说明书

这份说明书按实际使用路径组织内容,帮助你从文件导入、图谱管理一路走到引物、酶切、序列浏览和实验性功能页面。

基础工作流

先理解总流程

最推荐的使用顺序是:先预读文件夹,导入到文件管理,再决定打开哪些图谱;之后进入图谱分析页做引物、Feature、酶切和序列层面的工作。

预读阶段

先建立候选集合,避免一上来就把所有图谱都塞进分析页。

文件管理阶段

负责检索、筛选、载体识别、Feature 归类和批量打开。

分析阶段

围绕已打开图谱进入引物、Feature、酶切、序列浏览以及实验性模块。

基础工作流 / 导入

导入与预读

建议优先点“选择文件夹(多级预读)”。这样软件会先读取目录结构和图谱元信息,再由你决定把哪些条目正式导入文件管理。

导入与预读示意
图中红色序号点基于页面实际元素坐标定位。当前截图使用的是内置假数据集 tutorial_project。

序号对应

  1. 顶部导入区:选择文件、选择文件夹、导入勾选项、全选预读、清空预读。
  2. 预读结果区:显示当前预读了多少个图谱、勾选了多少个、总体积多大。
  3. 文件管理入口区:导入后的目录树和待打开文件都会落到这里。

正确用法

  1. 先做预读,不要急着直接打开。
  2. 确认候选文件没问题,再点“导入勾选项到文件管理”。
  3. 进入文件管理后再决定真正要打开哪些图谱。
现在说明书中的图谱名、目录名、注释名全部是模拟名称,用来演示功能,不包含任何真实实验命名。
基础工作流 / 文件管理

文件系统视图

这里是整个软件的批量管理中枢。它负责显示目录树、图谱状态、载体识别结果,并提供按图谱名、引物名、Feature 名、DNA 序列的检索。

文件系统视图示意
当前假数据集被识别为 6 个完整载体和 2 个片段,便于说明完整载体 / 片段筛选的差异。

序号对应

  1. 文件管理子选项卡入口。
  2. 检索输入框:支持按图谱名、引物名、Feature 名、DNA 序列切换检索模式。
  3. 打开按钮:在第一次打开之后,会切换到“只打开新勾选的图谱”逻辑。
  4. 文件树主体:显示目录层级、状态标签、是否已打开以及文件大小。

这个页面能解决什么问题

  • 从大量图谱里只挑一部分进入分析页。
  • 快速筛出完整载体或疑似片段。
  • 根据一段 DNA 序列反查可能命中的图谱。
基础工作流 / Feature归类

按 Feature 分类

这个页面会读取所有已打开图谱的 Feature,滤掉全体共有项,再按亚群组织成多级目录树。适合项目级 Feature 批量整理。

按Feature分类示意
当前示例中使用的是假 Feature,如 Module BlueCarrier bridgeReporterCore

序号对应

  1. “按Feature分类”子选项卡入口。
  2. 筛选控制区:最小出现图谱数、Feature 检索、Feature 亚型筛选、是否仅含完整载体图谱。
  3. Feature 快速标签区:点击某个标签后会把对应 Feature 置顶聚焦。
  4. 多级目录树:按“亚群 -> Type -> Feature -> 图谱”组织结果。

亚型含义

  • 载体标志:如 oriAmpRAmpR promoterf1 ori
  • CDS型:多数实例被 ORF 预测支持。
  • NC型:多数实例不落在 ORF 中。
  • 混合:不同图谱上的支持情况不稳定。
图谱分析

进入分析页之后你会看到什么

图谱分析页先锁定当前图谱,再按模块进入引物与PCR、Features、酶切规划、序列可视化及序列比对。下面按功能拆开讲。

图谱分析 / 引物与PCR

引物与PCR:逐图谱整理

默认会落在单图谱视角下的引物总览。这里适合先看一张图谱已经自带了哪些引物,再继续做 PCR 配对与局部定位。

逐图谱引物总览示意
当前激活图谱为模拟图谱 Vector-Alpha-Blue.dna

序号对应

  1. 当前图谱选择器。
  2. 摘要卡片:长度、拓扑、Feature 数、Primer 数、载体识别。
  3. 分析主标签栏。
  4. 逐图谱整理入口。
  5. 引物总览入口。

适合什么时候用

  • 看一张图谱自带的引物清单。
  • 准备做单图谱 PCR 产物计算。
  • 先确认当前图谱状态,再切到其它分析标签。
图谱分析 / 引物与PCR

引物与PCR:合并列表

合并列表适合多图谱联查。软件会把相同引物归并到同一条记录里,并显示它来自哪些图谱。

引物合并列表示意
这个页面最适合做项目级引物复用梳理,而不是单图谱查看。

序号对应

  1. 合并列表模式入口。
  2. 参与合并的图谱选择区。
  3. 全选图谱按钮。
  4. 引物总览子页入口。
  5. 合并后的引物表。

推荐工作流

  1. 先把一个项目相关图谱都打开。
  2. 进入合并列表并全选图谱。
  3. 快速确认哪些引物是通用的,哪些只在某个构建中出现。
图谱分析 / Features

Features 页面

这个页面更偏向单图谱的 Feature 细读。你可以先看环形 Feature 分布,再落到表格里看起止、长度和类型。

Features 页面示意
示例里所有 Feature 都已经是假名,不再含真实实验模块命名。

序号对应

  1. 单一图谱模式入口。
  2. Feature 单图谱区标题。
  3. 环形 Feature 图。
  4. Feature 详情表。

你会在这里做什么

  • 核对某张图谱的模块结构。
  • 检查 Feature 注释的命名和类型是否合理。
  • 配合文件管理页的批量归类结果,回看单个图谱细节。
图谱分析 / 酶切规划

酶切规划

酶切规划页可以做自动规划、自选模拟、位点统计和多图谱对比。当前截图展示的是“自选规划”,会优先列出能完整切下目标 Feature 的方案。

酶切规划示意
假数据序列中故意内置了常用酶切位点,便于演示方案摘要和切下片段大小。

序号对应

  1. 自选规划入口。
  2. 目标 Feature 选择区。
  3. 方案选择器。
  4. 图谱切点示意。
  5. 候选方案表。

这个页面的价值

  • 快速找出能完整切下目标模块的酶组合。
  • 直接看到“切下片段多大、线性化载体多大”。
  • 对多位点酶给出明确提醒,避免误选切点。
序列工作台

序列相关能力都从这里展开

序列工作台既是浏览器,也是后续设计器的入口。序列检索、ORF 显示、酶切位点、同源臂设计、标准引物设计都和这里直接相连。

序列工作台 / 浏览

序列浏览

序列浏览页是最常驻的操作界面。你可以在这里检索 DNA、蛋白、Feature 名,也可以打开 Feature 条、酶切位点、ORF 和实验性同源臂设计入口。

序列浏览示意
这里已经切到模拟图谱的真实序列显示,而不是空白占位。

序号对应

  1. 序列检索输入框。
  2. 同源臂引物设计入口。
  3. 序列主视窗。

从这里可以继续做什么

  1. 拖选序列后进入标准引物设计。
  2. 点击“同源臂引物设计”走双端点标记流程。
  3. 把选区直接送入“序列溯源”。
序列工作台 / 设计

标准引物设计

这是本地快速版引物设计器。当前示例对模拟图谱区间 250-449 做设计,已经返回了 20 组候选引物对。

标准引物设计示意
这一页用的是脱敏后的假序列,所以不会暴露任何真实引物或真实模块名。

序号对应

  1. 目标区间起点输入。
  2. “设计引物”按钮。
  3. 候选结果中的“定位产物”按钮。

常用操作逻辑

  • 先定目标区间,再设上下游搜索、产物长度和 Tm / GC 约束。
  • 结果出来后,可以定位产物,也可以导出到引物总览。
  • 普通引物设计与同源臂引物设计是两套独立规则。
参数项 用途
目标起点 / 终点 限定你希望被覆盖的核心扩增区段。
上下游搜索 允许引物在目标区两侧额外搜索可结合位点,支持设为 0。
产物最小 / 最大 控制 PCR 产物长度窗口。
引物最短 / 最长 限制单条引物的长度范围。
目标 Tm / 容差 把候选方案收敛到目标温区附近。
GC 最小 / 最大 避免极端 GC 的候选序列。
实验性功能

这些页面适合做快速判断,不建议直接替代最终人工审核

下面三页分别解决多图谱局部比对、版本链追踪和外部数据库溯源。它们都很实用,但更适合做加速判断,而不是作为唯一结论来源。

实验性功能 / Align

多图谱比较 Align

Align 实验适合快速回答“这两张图谱哪里相同、哪里不同”。当前示例已经完成一次本地比对,并显示 Ref / Qry 逐段对照。

Align 页面示意
这里显示的是内置假图谱之间的差异,不涉及任何真实序列。

序号对应

  1. 参考图谱选择器。
  2. 运行 Align 按钮。
  3. Align 结果区。

适用场景

  • 比较两个近缘构建的插入 / 缺失 / 替换。
  • 看模板和最终产物是否在目标区段一致。
  • 做“同源区段定位”而不是正式序列发表级比对。
实验性功能 / 版本追踪

谱系与版本

这个页面会把一批图谱当作构建链来梳理。它综合文件 Notes 历史字段和序列差异,生成父版本、子版本和变化摘要。

谱系与版本示意
当前例子中的谱系边和变更摘要,全部来自模拟图谱之间的人造差异。

序号对应

  1. 谱系根图谱选择器。
  2. 复制谱系变更日志按钮。
  3. 谱系边表中的快速查看入口。
  4. 当前选中边的详细摘要。

这个页面输出什么

  • 父版本 -> 子版本的边表。
  • SNP、插入、缺失和长度差摘要。
  • Notes 中的 Created / LastModified / CreatedBy 历史字段。
实验性功能 / 外部检索

序列溯源

序列溯源页对接的是 NCBI 官方 BLAST。你可以直接把已打开图谱写入查询,也可以粘贴一条或多条 FASTA,再把命中结果按 Feature 或物种整理。

序列溯源示意
示例截图停留在提交前状态,重点展示参数配置和结果整理入口。

序号对应

  1. “直接使用已打开图谱序列作为查询”开关。
  2. 提交官方 BLAST 检索按钮。
  3. 结果整理方式选择器。

推荐做法

  1. 如果只是排查来源,优先直接勾选已打开图谱作为查询。
  2. 只有在确有必要时才提高命中条数,避免等待时间过长。
  3. 若后续要在本软件内继续对齐,提前选好 Align 目标图谱。
补充说明

使用建议与注意事项

最后把几个真正影响体验的建议集中放在这里,方便第一次上手时少走弯路。

场景 推荐入口 原因
批量整理项目图谱 导入与预读 -> 文件系统视图 先建立候选集合和检索索引,再决定要打开哪些图谱。
查看某个模块在哪些构建里出现 按 Feature 分类 可以去掉全体共有项,只保留真正有分群意义的 Feature。
检查项目内已有引物 引物与PCR -> 合并列表 相同引物会自动归并,并标出来源图谱。
做快速 PCR 方案 序列浏览 -> 标准引物设计 可以直接从选区进入,参数填写成本最低。
做同源臂长引物 序列浏览 -> 同源臂引物设计 需要以序列页上的双端点选择作为输入。
比较构建差异 Align / 谱系与版本 一个看局部对齐,一个看整体版本链。